Pannarase全能核酸酶

Pannarase是一种来自于粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens），经基因工程改造的核酸内切酶，能够将各种类型的DNA和RNA降解成3~5个碱基长度的5’-单磷酸寡核苷酸，又被称为“全能核酸酶”。广泛用于疫苗、细胞与基因治疗等领域的病毒纯化工艺。

产品性质：

项目	描述
规格	10万/50万/500万 U/管
分子量	27kDa
纯度	≥99% (SEC-HPLC)
比活性	≥2x106 U/mg
最适pH	8.0
最适温度	37°C
辅助因子	1-10 mM Mg2+
缓冲液	20 mM Tris-HCl pH 8.0, 2 mM NaCl, 2 mM MgCl2, 50% (v/v) 甘油
储存温度	-20°C，避免反复冻融（由于甘油的存在，-20°C条件下不会冻住）

活力单位：通过测定其裂解鲱鱼精DNA底物的能力（herring Sperm DNA， Sigma，目录号D7290）一个单位Pannarase全能核酸酶活力定义为在37°C pH8.0反应条件下30分钟内导致A260nm值降低1.0（相当于完全消化37ug DNA）。

产品特点：

SEC-HPLC：（纯度99.72%）

尺寸排阻色谱显示高纯度，无聚集体产生

LC-MS检测：

液质联用分析蛋白分子与理论值一致，无杂质峰，结构均一

应用案例：

对质粒DNA的酶切活性

对比不同品牌核酸酶的酶切效果图

（反应条件：20uL反应体系其中质粒DNA浓度为1mg/ml）

运输和保存方法：干冰运输。-15℃ ~ -25℃保存，有效期2年。

推荐使用条件：

* “最适条件” 指的是在此条件下Pannarase 核酸酶可保持>90%的活性

** “有效条件” 指的是在此条件下Pannarase 核酸酶可保持>15%的活性

使用方法：

1.对于大肠杆菌破碎液

为了达到降低粘度的目的，加入核酸酶的用量须根据破碎液的菌体浓度来决定，如果菌体浓度在50%，建议加入的核酸酶的量为1：1000-5：1000，即50万-250万U/L。如果菌体浓度在5%，则可以按照1：10000-5：10000的比例加入。

2.对于细胞裂解液

可以按照106-107个细胞加入500单位核酸酶。

3.对于纯化后的腺病毒或者病毒疫苗

由于DNA含量相对较少，可以按照万分之一到万分之五也就是每毫升5个单位的最终浓度加入。

注意事项：

1.酶的最佳作用条件为pH 8.0–11.0，37°C，30min。

2.镁离子对酶活是必要的，推荐使用浓度为2mM，如样品中有DETA等金属螯合剂，需去除或加入过量镁离子。

3.酶活性比较稳定，室温放置短期内不会有太大影响，长时间保存需放置在-20°C冰箱内。酶用不含甘油缓冲液稀释后尽快使用，不推荐冻存后再使用。

4.对于仅为降低粘度为目的，可以直接加入核酸酶，室温缓慢搅拌30min。

订购信息：

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Q: 什么是Pannarase全能核酸酶

A: Pannarase是一种来源于 Serratia marcescens 的非特异性核酸内切酶，该酶可以将任何形式的 DNA 和 RNA (线性、环形、超螺旋)降解成3-5bp 的寡核苷酸，并可在一系列宽泛的操作条件下保持高效性

Q: 哪些因素会影响Pannarase全能核酸酶的消化效果？

A: 酶的添加量，反应条件（例如：时间、温度、pH值），缓冲环境（例如：是否存在酶的抑制剂）等。不同样本的最佳使用量，需要经过实验摸索。

Q: 哪些条件会抑制Pannarase全能核酸酶的活性？

A: Pannarase全能核酸酶可在较宽条件下保持活性，二价阳离子（Mg²⁺）对其活性至关重要。当在含有以下物质的体系中，其活性会受到抑制：> 300 mM一价阳离子，> 100 mM磷酸盐，> 100 mM盐酸胍，> 100 mM硫酸铵等。

当体系中含有较高浓度一价阳离子时，推荐选择逐典耐高盐全能核酸酶

Q: 如何去除Pannarase全能核酸酶？

A: 使用常规色谱法，如亲和色谱法和离子交换色谱法，可以很容易地去除Pannarase全能核酸酶。其他方便的纯化方法，如切向流过滤（TFF）也适用于从生物制品中去除Pannarase全能核酸酶。