核酸酶的历史
核酸酶是一类能够水解核酸中磷酸二酯键的酶，科学家根据酶切底物的不同分为核糖核酸酶、脱氧核糖核酸酶。
脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNaseI)在1905年科学家在牛胰腺中发现，由此核酸酶第一次走进人们的视野。此外，微生物的研究也发现一些微生物能胞外分泌核酸酶，这些磷酸二酯酶能够在胞外降解DNA或RNA，为细菌提供碳源或者起到防护功能。
图1.细菌核酸酶的不同功能[1]
非特异性核酸酶的发现
20世纪五六十年代，金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等分泌的胞外核酸酶也被陆续分离出来。底物测试发现这些酶对DNA和RNA表现出非专一性，因此被新归类为非特异性核酸酶。
非特异性核酸酶的重大发现是在1957年，Jeffries等科学家首次发现粘质沙雷氏菌能够降解DNA和RNA[2]。1962年Eaves等人在粘质沙雷氏菌的培养液中分离出粘质沙雷氏菌胞外核酸酶（Serratia marcescensnuclease，SMnuclease）。
经过鉴定，SMnuclease 是一种糖类非专一性核酸内切酶，水解核酸后的产物为3～5个碱基长度的5’-单磷酸寡核苷酸，来防止外源DNA摄入。
SMnuclease是迄今已知的唯一能水解所有核酸类型的核酸酶，包括单链，双链，线性和环状DNA或RNA，又被称为全能核酸酶。在水解速度上，SMnuclease也是核酸酶家族中独一档的存在，其DNA水解速度是DNaseI的34倍，是金黄色葡萄球菌核酸酶的4倍。
全能核酸酶的商品化
20世纪八十年代以来，重组蛋白等生物药开始进入医药市场。通过微生物发酵的形式生产蛋白，外源的核酸不仅会增加裂解液的粘度，还能在药物生产中降解过多的宿主DNA残留，以规避致癌等风险。
传统生物制药工艺使用层析等方法去除宿主DNA，但成本会比较高。核酸酶能够降解各种形式的（双链，单链，线状，环状，天然或变性）DNA和RNA，SMnuclease作为去除宿主DNA残留更理想的手段开始被人们关注。BenzonPharma A/S公司最先在大肠杆菌中重组表达了该光谱核酸酶，故名Benzonase[3]。
随着细胞和基因治疗行业在国内的热度高涨，核酸酶作为纯化的关键原料也被生物行业重点关注。由于进口全能核酸酶价格原因和国产化替代趋势，国内供应商开始了自主研发全能核酸酶产品的道路。质量与价格成为了目前核酸酶产品热烈讨论的话题。
Pannarase全能核酸酶
上海逐典出品的Pannarase全能核酸酶，高效、合规、可耐受各种生产条件，为GMP环节所设计，不失为疫苗、重组蛋白、病毒载体等生物制药行业中去除核酸的理想选择。
产品特点：
- Pannarase无动物源性, 无氨苄青霉素，可高效降解单链、双链、线性、环状、超螺旋等任何形式的DNA及RNA
- 上游工艺采用包涵体溶解复性技术，比活性更高
- 下游工艺中选择阴阳离子层析替代亲和层析，无需引入His标签，从而消除产品引入金属镍的风险
- 生产车间严格按照GMP体系建设，每批次都有对应的生产批记录
- 标准品定量，质谱均一性认证，肽图Mapping 验证，产品批次间稳定性好
参考文献：
[1]Sharma P, Garg N, Sharma A, Capalash N, Singh R. Nucleases ofbacterial pathogens as virulence factors, therapeutic targets anddiagnostic markers. Int J Med Microbiol. 2019 Dec;309(8):151354. doi:10.1016/j.ijmm.2019.151354. Epub 2019 Aug 30. PMID: 31495663.
[2]Jeffries CD, Holtaman DF, Guse DG. Rapid method for determining theactivity of microorganisms on nucleic acids. J Bacteriol. 1957Apr;73(4):590-1. doi: 10.1128/jb.73.4.590-591.1957. PMID: 13428699;PMCID: PMC314626.
[3]Benedik, M.J., Strych, U., 1998. Serratia marcescens and itsextracellular nuclease. FEMS Microbiol. Lett. 165, 1–13.
今天先聊到这，下一期跟着小编一起看看全能核酸酶结构和功能吧，敬请期待哦。
