文章来源公众号：bloki 作者：bloki
有很多研究者在做LNP体内制备CAR-T，我们分享过不少相关文章。也有研究者在做病毒体内制备CAR-T，我们已经整理分享过2篇可以体内制备CAR-T的慢病毒、体内制备CAR-T的病毒样颗粒，又看到一篇，整理分享之，具体内容如下：
作者想利用尼帕副粘病毒Nipah Virus包膜蛋白G、F，G负责粘附靶细胞，F负责融合靶细胞（上图来源于网络）
对尼帕病毒G蛋白进行突变（防止结合G蛋白天然受体Ephrin B2/B3）、截掉尾部，添加靶向T细胞的scFv、VHH或DARPin
scFv、VHH、DARPin示意图（上图来源于网络）
两种包膜：纯靶向G蛋白+F蛋白包膜，靶向G蛋白+非靶向G蛋白+F蛋白包膜
靶向G蛋白+非靶向G蛋白混合包膜，DARPin靶向CD8，递送效率最高（DARPin优于scFv）
摸索靶向G蛋白、非靶向G蛋白混合比例以实现高效递送；DARPin助力特异性靶向CD8+ T细胞
用DARPin、VHH实现靶向递送CAR到CD8 T细胞，效率高于scFV
用DARPin靶向CD3或CD4递送效率高于scFv
用VSV-G会脱靶递送到CD8-细胞
摸索靶向G蛋白和非靶向G蛋白比例以实现高效递送CAR
用细胞生产载体颗粒过程中可能发生RNA的异常切割，影响RNA完整性，作者对载体颗粒生产进行了优化：NTRP10细胞+SupA2KO（1.65s就是常规的293T细胞）
作者NTRP10细胞+SupA2KO生产出的载体颗粒上不会有CAR蛋白（有CAR蛋白的话，载体颗粒会结合靶向细胞，进而靶细胞表达CAR，CAR掩护肿瘤抗原，发生逃逸）
作者的病毒体内T细胞上实现CAR表达（血）
作者的病毒体内T细胞上实现CAR表达（骨髓、脾脏）
作者的病毒体内搞掉B细胞
作者的病毒体内特异性让T细胞表达CAR
肝几乎没有载体，暗示作者病毒的特异性
