无论是实验室规模样品制备、还是生产规模工艺过程，去除核酸都可以改善工艺流程，如蛋白纯化、病毒载体制备、mNGS中样品处理等过程。而核酸酶的选择，就显得特别重要。Heat Labile-Salt Active Nuclease (热不稳定性耐高盐核酸酶，HL-SAN) 是一种非特异性内切酶，在高盐浓度下具有最佳活性；且该酶在多种缓冲液中都有活性，很容易通过还原剂处理而失活。这些特性使HL-SAN在需要去除DNA和RNA的应用中，更为适合。核酸污染，特别是宿主基因组DNA污染，在几乎所有工艺流程及生物制品的生产中，都是需要重点解决的问题。一方面，宿主DNA的存在，影响目标产物的纯化及下游质量分析等。另一方面，宿主DNA残留能引起机体严重的免疫反应，是生物制品的关键质量参数之一，FDA及NMPA等对Host Cell DNA (HCD)有严格的质控要求。宿主基因组DNA中，组蛋白与DNA形成核小体，核小体紧密折叠形成结构复杂的染色质。组蛋白与DNA间存在强烈的离子作用及疏水作用，再加上特殊的结构，导致宿主DNA很难被准确检测并清除。已有文献表明，高盐浓度下组蛋白与DNA解离相对彻底，这有利于宿主DNA的检测及去除。但市售的绝大多数核酸酶在高盐浓度下活性很弱，甚至完全失活。而耐高盐的HL-SAN成了这类应用的理想选择。
一，逐典耐高盐全能核酸酶优势
1.更高盐耐受度
当盐离子浓度在600~700mM时，初代全能核酸酶几近失活，而SAN仍能保持较高活性。
图1.不同盐浓度下耐高盐全能核酸酶(SAN)与初代全能核酸酶活性对比
2. 高效核酸降解力
同对照组相比，添加SAN后能够有效去除核酸残留。
图2 加入SAN 前后的消化效果图
二，逐典耐高盐全能核酸酶用途
1.疫苗和病毒样品制备中高盐环境下DNA污染的去除
2.与细胞或细菌裂解液配合使用，去除粗提物中的核酸，降低溶液粘性，提高蛋白质产量。
3.减少存放的外周血单细胞(PBMC)的结块现象
4.降解核酸，利于不可溶性蛋白复性前高质量包涵体制备。
5.有效去除带负电荷的核酸对双向SDS-PAGE蛋白样品的影响，改善蛋白质分离效果，增强2-DE分辨率
三，使用指导
1. DNA去除方案
从细胞抽提物或细胞裂解液中去除DNA污染，HL-SAN的使用量受到多种因素影响，如细胞类型、裂解液组成、NaCl浓度、Mg2+浓度、裂解液pH等。参考方案见Figure 1。比如，对于1ml细胞裂解样品，调整到0.3-0.75 M NaCl浓度，加入1000 U HL-SAN，15℃-37℃温度条件下孵育30-60min，或者4℃过夜。Mg2+是必须的。
2.灭活
灭活是通过添加还原剂（TCEP或DTT）来实现的，推荐用TCEP（因为TCEP在磷酸盐溶液中不稳定，特别在中性pH下）。不同工艺流程中，通过改变孵育时间、温度和还原剂的浓度等来灭活该酶。一般情况下， 25-37℃反应5-10分钟，可以灭活99%以上的酶。为了避免酶恢复活性、再次激活，保持低浓度还原剂，如0.1-0.5 mM DTT或TCEP，或延长灭活反应时间。
四，客户之声
