文章来源公众号：Of Studies 作者：Of Studies
上个月底Science上线了一篇体内制备CAR-T的文章，第一单位就是6月底刚刚被艾伯维（AbbVie）以高达21亿美元现金对价收购的Capstan Therapeutics，在前面分享过这个研究团队在2022年发的一篇Science，CD5靶向的LNP体内生成CART细胞治疗心肌纤维化，团队里面有CAR-T大牛Carl H. June，2023年诺奖获得者Drew Weissman等，把这篇新的文章再分享给大家：新型离子化脂质Lipid L829：显著减少肝脏脱靶递送，快速代谢，毒性更低。
CD8+ T细胞靶向：通过抗CD8抗体修饰LNP，精准递送mRNA至CD8+细胞毒性T细胞（避免CD4+细胞引发细胞因子风暴）。
优化CAR（抗CD19）mRNA的UTR和密码子，使表达效率提升10倍，功能更强（细胞毒性、增殖、细胞因子释放）。
1、可电离脂质L829（Ionizable lipid L829）可减少tLNP对肝脏的脱靶递送A:tLNP由五类脂质构成，表面偶联抗体（靶向配体），内包mRNA。B:Benchmark LNP，强荧光信号在肝和脾，表明肝脱靶严重。L829-tLNP信号集中在脾脏，肝脏脱靶明显降低。表明L829减少了肝非特异摄取，提高了靶向递送效率。C:L829在肝中清除更快，24小时基本排出；Benchmark脂质仍持续存在。表明L829具有更好的代谢与安全性特征。D:L829组炎症标志物水平明显低于Benchmark组，说明L829诱导的全身炎症反应更低，更安全。E:L829组比Benchmark组表现出更低的肝酶升高，说明L829在非人灵长类（猴）中也表现出更好肝安全性。F:比较CD5-LNP与 CD8-LNP，CD8-LNP高度集中在CD8+T细胞，几乎无在其他细胞类型。CD5-LNP分布更广，部分表达在CD4+T、B细胞、单核细胞中。说明CD8-LNP具有更强的靶向特异性。CD5 抗体修饰的 tLNP 会有更大比例脱靶到非效应细胞，而 CD8能够更精准地定位到 CD8⁺ T 细胞。
G:在人源化小鼠模型中，CD8-LNP成功将mRNA递送至人源CD8⁺ T细胞，CD4表达极低。2、对anti-CD19的CAR mRNA的优化，提升了其在T细胞中的表达水平和功能活性。3、装载B细胞靶向CAR的tLNP在自身免疫患者样本和人源化小鼠中迅速诱导B细胞耗竭
4、使用装载B细胞靶向CAR mRNA的tLNP治疗，可在食蟹猴体内实现深度B细胞清除。
3次给药（0.5–2.0 mg/kg）可深度清除B细胞（外周血、脾脏、淋巴结），CAR+ CD8+ T细胞峰值达85%。
5、经tLNP治疗实现全面B细胞清除后，B细胞谱系恢复过程中以初始B细胞为主。
C1001、C3002、C4002 等是食蟹猴（cynomolgus monkey）实验中的动物个体编号。
小结
tLNP能够避免传统CAR-T的淋巴清除毒性，摆脱专业化CAR-T中心限制，适用于大规模自身免疫病群体（全球约10%人口）；mRNA瞬时表达，避免病毒载体导致的长期B细胞缺失或继发恶性肿瘤；未来需探索长期重复给药安全性、推进自身免疫病（如狼疮）和B细胞恶性肿瘤的临床试验。
