蛋白质的生物活性是各种蛋白质功能的体现。或者您可以理解只有蛋白质有活性的概念,它才能执行它的功能。具有生物活性的蛋白质称为活性蛋白质,即具有生物活性的活性蛋白质。从理论上讲,天然蛋白都是活性蛋白,而重组蛋白并不总是活性蛋白,因为重组蛋白的产生是一个复杂的过程,其中许多因素对其生物活性至关重要,例如理想的表达系统、合适的表达载体、纯化等。
1. ED50的计算:
逐典的蛋白产品ED50(即半数有效浓度,其定义是对特定细胞引起 50% 最大反应的蛋白浓度,单位为ng/mL)可在蛋白产品COA中获取,这种活性表示法仅适用于剂量反应曲线呈 S 形的细胞因子。将1 ng/mL ED50 定义为 1 unit,则产品生物学活性 Specific Activity 的换算公式如下:
Specific Activity(units/mg)= 1 × 10 6 ÷ ED50(ng/mL)
以上计算公式并不适用于International Units(IU)和ED50的换算关系,我们建议采用国际标准品对比相同实验获得该蛋白的IU值。
2. 影响ED50的因素:
产品说明书中的实验方案只是确认该产品的ED50,如果客户的实验类型与我们相同,则可以按照产品标定的生物活性进行实验;若实验采用了不同的细胞种类或方法,我们建议客户按照梯度浓度通过实验获得最佳ED50值,并依据此数值制定相应的实验方案以及产品的添加量。