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细胞通讯的摩斯密码:EGF & TGF生长因子使用指南,解锁实验关键开关!

发布日期:2025-07-10 浏览量:13

在微观的细胞王国里,没有电话,没有微信,细胞们如何精准调控自己的命运——何时分裂增殖?何时分化成熟?何时迁移修复?何时功成身退?答案就藏在那些被称为“生长因子”的蛋白质小分子中!它们如同细胞间的摩斯密码,传递着至关重要的生命指令。今天,我们聚焦两位“明星信使”:EGF(表皮生长因子)和TGF(转化生长因子),揭秘它们的功能奥秘与实验应用技巧!


一、明星登场:认识EGF与TGF家族

1. EGF (Epidermal Growth Factor)表皮生长因子

Ø身份:最早被发现、研究最广泛的生长因子之一,属于EGF家族(包含HB-EGF, TGF-α等)。

Ø核心使命:强力促进细胞增殖!

 靶细胞:广泛作用于上皮细胞、成纤维细胞、角质形成细胞、多种干细胞等。

 关键作用:

刺激细胞分裂与增殖:加速伤口愈合、组织修复。

促进细胞迁移:在胚胎发育、伤口愈合中起关键作用。

抑制细胞凋亡:维持细胞存活。

参与发育分化:影响特定组织器官的形成。

Ø信号通路:结合细胞膜上的EGFR(表皮生长因子受体) → 触发受体二聚化及自磷酸化 → 激活下游RAS-RAF-MEK-ERK (MAPK通路)和PI3K-AKT-mTOR通路 → 促进细胞周期进程(G1到S期)及生存。


2. TGF (Transforming Growth Factor)转化生长因子

Ø身份:一个庞大的超家族,成员众多,功能复杂多样,甚至相反!最核心、研究最深入的是TGF-β亚家族(包括TGF-β1,β2,β3, Activins, Nodal, BMPs等)。

Ø核心使命:高度环境依赖,功能“双面刃”!

 靶细胞:几乎影响所有细胞类型。

 关键作用(以TGF-β1为代表):

抑制增殖:对大多数上皮细胞和免疫细胞是强效的生长抑制剂(使细胞停滞在G1期)。

促进分化:诱导间充质干细胞向成骨细胞、软骨细胞分化;参与上皮间质转化(EMT),这在胚胎发育、伤口愈合(早期)、但也与肿瘤转移相关。

刺激细胞外基质合成:促进胶原等ECM蛋白产生,对组织纤维化至关重要(过度则导致病理性纤维化)。

免疫调节:主要发挥免疫抑制作用,调节T细胞分化,维持免疫耐受。

促进凋亡:在某些情况下诱导特定细胞死亡。

Ø信号通路:结合细胞膜上的II型受体 → 招募并磷酸化I型受体 → 激活受体调节的Smad蛋白(R-Smads:Smad2/3 for TGF-β/Activin/Nodal, Smad1/5/8 for BMPs)→R-Smads与Co-Smad (Smad4)形成复合物入核 → 调控靶基因转录。非Smad通路(如MAPK, PI3K)也参与其复杂调控。


二、实验室应用:如何正确使用这些“魔法因子”?

关键操作要点:步步为营

1. 储存与复溶:

 严格按说明书操作!通常是冻干粉或高浓度溶液保存在-20°C或-80°C。

 复溶时使用无菌、无内毒素的溶剂(通常是含载体蛋白如BSA的缓冲液或培养用基础液)。避免反复冻融!

 复溶后根据使用频率分装,储存于-20°C或-80°C。工作液可在4°C短期存放(1-2周,依说明书)。


2. 工作浓度:黄金法则!

 浓度范围差异巨大!切忌经验主义!

 必查文献!参考你所研究特定细胞类型的相关文献中使用的浓度。

 必看说明书!商品化因子会提供建议浓度范围。

 典型参考范围(需验证!):

EGF:常用1 - 100 ng/mL (如原代角质形成细胞培养常加10-20 ng/mL)。

TGF-β1:常用0.1 - 20 ng/mL。浓度过低可能无效,过高可能诱导非预期效应(如强EMT或过度纤维化)。1-5 ng/mL常用于抑制增殖或诱导轻度EMT。

 进行浓度梯度预实验:对于新细胞或关键实验,务必设置不同浓度梯度(如0, 0.1, 1, 5, 10, 20 ng/mL),找到最优效果且无细胞毒性的浓度。


3. 添加方式:

 直接加入培养基:最常见方式。在无菌操作下,将计算好体积的生长因子溶液轻柔加入完全培养基中,充分混匀。

 更换含因子培养基:在需要精确控制作用时间或去除旧因子影响时(如诱导分化),吸掉旧培养基,加入新配制的含因子培养基。


4. 作用时间:

 EGF:促进增殖通常需要持续暴露(每次换液都需添加)。

 TGF-β:其效应可能是时间依赖性的:

短期处理(几小时到几天):可能快速激活信号(如磷酸化Smad2/3),诱导部分基因表达。

长期处理(数天到数周):才能观察到明显的表型变化(如生长抑制、EMT、基质沉积、分化标志物表达)。需根据实验目的设计处理时长。


逐典生物推出多种细胞培养关键生长因子因子,具备高生物活性,高纯度和高结构均一性,质控严格,确保强特异性、高灵敏度、高稳定性及良好的重复性,全面助力MSC相关药物研发及上市。


1.bFGF(CY024F0010)

重组人bFGF利用小鼠Balb/c 3T3细胞刺激细胞增殖,ED50≤0.05 ng/mL,对应的比活性≥1.0 × 107units/mg

2.EGF(CY069F0010)

重组人EGF通过小鼠Balb/c 3T3细胞刺激细胞增殖,ED50≤0.1 ng/mL,对应的比活性≥1.0×107Units/mg


订购信息

产品名称

产品规格(μg)

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EGF

10 μg

CY069F0010

20 μg

CY069F0020

50 μg

CY069F0050

50 μg

CYG069F0050

500 μg

CYG069F0500

bFGF

10 μg

CY024F0010

20 μg

CY024F0020

50 μg

CY024F0050

50 μg

CYG024F0050

500 μg

CYG024F0500

PDGF-AA

10 μg

CY056F0010

20 μg

CY056F0020

50 μg

CY056F0050

PDGF-BB

10 μg

CY035F0010

20 μg

CY035F0020

50 μg

CY035F0050



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