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萤光素酶如何成为最理想的报告基因?

发布日期:2024-04-16 浏览量:35

一,什么是报告基因

报告基因:是一种编码易被检测的蛋白质或酶的基因,其表达产物非常容易被鉴定。

传统基因表达检测方法的问题:

1.通常检测基因表达是通过RT-qPCR或qPCR(mRNA水平)或Western Blot(蛋白水平)

2.操作方法繁琐,难于检测

报告基因的优点:

1.蛋白表达水平检测

2.检测简单,易于定量


二,什么是理想的报告基因

1.具有酶活性(信号放大能力

2.蛋白小

3.没有内源性表达,背景低

4.易于定量

5.高灵敏度、线性范围宽

6.反应迅速

三,萤光素酶

在生物医药行业最主要的报告基因为荧光素酶报告基因。最常见的荧光素酶 (luciferase)基因来源于萤火虫。萤火虫萤光素酶在ATP、氧气和Mg2+存在条件下,催化萤光素的氧化羧化,释放出光信号,这是任何已知生物发光系统中效率较高的发光反应,因而被设计用来检测和定量哺乳动物细胞中萤火虫萤光素酶的表达。相对于其他报告基因,萤光素酶具有诸多优势:检测灵敏度高,型号稳定性好,操作方便。

CHASELECTION逐典萤光素酶报告基因检测试剂盒旨在准确、灵敏、高效地测定萤火虫萤光素酶活性,应用高通量药物筛选、药物活性检测、大规模启动子功能测定、信号通路等研究。

逐典萤光素酶报告基因


针对报告基因检测不同的侧重需求,逐典推出了3种检测系统。


逐典萤光素酶报告基因优势:

1. 检测灵敏度高,信号稳定性好

HEK293-NFK B-LUC细胞加入梯度稀释的TNF 在37C、5%CO条件下刺激6小时后,分别用增强型、超敏型、稳定型检测试剂进行信号检测。


2. 操作方便

仅需将底物和萤光素酶检测缓冲液混合后直接加入到细胞即可。


3. 稳定性好

同时在10次反复冻融实验中,逐典全系列报告基因检测试剂盒显示出较强的稳定性。


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