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细胞培养不再难:贴壁细胞培养技巧全攻略!

发布日期:2024-04-08 浏览量:79

细胞生长特性分为两种,一种是贴壁一种是悬浮,不同的细胞形态对应的操作方法也大有不同,今天我们主要讲解一下贴壁细胞的相关培养技巧。

在操作贴壁细胞的过程中,消化环节确实至关重要。消化时间的长短需要根据每个细胞的状态进行精确调整,以确保细胞的健康和完整性。消化过度或消化不充分都可能对细胞造成不可逆的影响,因此,了解并准确判断贴壁细胞的状态对于确定消化时间至关重要。

贴壁细胞状态,分为以下几种:

1,疏松贴壁细胞

细胞传代密度控制在80%左右最少不能低于60%,消化时间控制在1-2分钟左右,传代后48小时内不要动该细胞,让其慢慢贴壁,需要观察时也要轻拿轻放。

如果在液体中还存在未贴壁的细胞,可以在下次换液时通过离心收集这些细胞。这样既能保证细胞的充分利用,又能避免未贴壁细胞对实验结果的干扰。

2,容易分化的细胞

需使用较好的血清培养,尽量让细胞生长密度高一些,消化时观察细胞的形态变化,变圆后及时终止消化处理。

减少吹打次数,避免不必要的机械损伤;轻柔吹打,避免气泡产生,细胞呈单个状态即可。

3,生长缓慢的细胞

如果细胞突然生长缓慢,需考虑是否是试剂的批次问题,细胞污染等可能性。如果本身细胞生长较慢,需使用较好的血清培养,必要时可加大血清浓度(5%-10%左右),传代时密度需在80%以上,密度太稀传代会直接影响细胞的生长周期及状态,传代比例控制在1:2或1:3。

4,聚团成长的细胞

聚团成长的细胞不容易生长满,在长到70%-80%左右就可以传代,消化时观察细胞的形态变化,细胞变圆并有少量细胞脱落即可终止消化,较难消化的细胞,可以分次消化,相对增加消化时间。

胰酶作为细胞贴壁工艺中的关键物料之一,酶活性、有无动物源等因素均至关重要。逐典TryPLUS消化液作为体外重组表达的胰酶类似物,与传统胰酶的消化动力学相似,但区别与传统胰酶,具有纯度高,细胞毒性低,细胞消化温和等特点,产品无动物源性,无需胰酶抑制剂,稀释即可进行终止,并且能够兼容多种细胞培养体系,定能成为您细胞培养工艺中的绝佳帮手!

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3. 室温贮存,无需胰酶抑制剂,稀释即可终止

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