活体动物生物发光成像，是将萤光素酶基因整合到细胞染色体DNA上以表达萤光素酶，当外源（腹腔或静脉注射）给予其底物萤光素（luciferin），即可在几分钟内产生发光现象。
而其中最常见也是应用范围最广泛的就是萤光素钾盐，关于萤光素钾盐这个产品，近期小编收到了一例客户咨询，接下来让我们一探究竟吧！
Q:您好，有一个实验上的问题想请教，在使用D-萤光素钾盐配置储备液时，有时会出现浑浊的现象，该怎么解决呢？
A:老师，您好，请问您配置液的浓度一般在多少呢？
Q:25mg/ml至50mg/ml都会有，在25mg/ml时也会出现不溶解的情况。
A:建议您添加少量碳酸钾溶液溶解，不过可能会延长信号接收时间。
小编温馨提示
D-萤光素钾盐若纯度可以达到99%以上，常温水溶液中溶解度可以达到41mg/mL！市面上很多产品，溶解度只有20mg/mL。甚至还会出现浑浊情况，这从侧面反映出其实有效纯度是不够的，很大程度上会影响实验进程。
关于逐典D-萤光素钾盐看这里
逐典D-荧光素钾盐，纯度高（HPLC>=99%）,溶解度可达40mg/ml以上，拥有较好的水溶性和脂溶性，相较于D-萤光素（游离酸）能更好应用于体外活细胞和体内活体生物发光成像等研究。
客户之声
常见问题答疑
Q:D-萤光素钾盐的纯度是多少？纯度大小对实验有影响吗？
A:D-萤光素钾盐纯度≥99 %，萤光素纯度越高，相应污染物含量越低，相反则越高，污染物浓度过高将抑制某些酶和细胞中的生物学过程，可能会给实验结果带来偏差，并且可能会对实验动物造成伤害。
Q:D-萤光素钾盐溶解度是多少？其溶液稳定吗？
A:D-萤光素钾盐溶解度在40 mg/ml以上，其水溶液短期内存放于-80℃，对实验效果没有明显影响。对于部分条件较敏感的实验，为了控制实验中的可变因素，推荐反应液新鲜配制。例如，荧光素酶过低、非最适的反应条件等都需要高质量的底物才能进行反应。
Q:D-萤光素钾盐的建议用量是多少？
A:活体成像：以10 μL/g体重确定注射量。每只小鼠接受150 mg D-萤光素钾盐/kg体重（如对于体重为10 g的小鼠，需要注射100 μL以提供1.5 mg D-萤光素钾盐）。
体外成像：一般使用150μg/ml的工作液用于体外细胞成像。
Tips: 注射方式、动物类型以及体重等都会影响信号的发射，需要适当摸索，待萤光信号达到最强稳定平台期，再用相应仪器进行成像分析。
Q:配置好的D-萤光素钾盐溶液如何储存？
A:工作液现配现用，理想情况下，配置好的储存液可于-20℃储存较短时间。如有必要，萤光素溶液可在-20℃储存长达3周。
Tips: 上述溶液在任何一种温度长时间贮存下都有可能导致信号退化哦！
Q:萤光素（酶）底物的形式有哪些？
A:分为D-萤光素游离酸、D-萤光素钾盐和D-萤光素钠盐，由于水溶性高，因此钾盐和钠盐通常是最通用的两种检测底物，其中又以钾盐作为活体动物检测使用的主要形式。
Q:如何确定不同模型的峰值信号时间?
A:生物发光信号的动力学具有组织依赖性。建议每5-10min对动物进行一次成像，最多40 min，为每个新模型创建一个动力学曲线。(常见信号峰值时间点在10-15 min左右，萤光反应发光一般在30 min后衰减，3 h后完全消失。)具体详见逐典D-萤光素钾盐说明书“萤光素动力学曲线制备”。
Q:萤光素底物可以透过血脑屏障吗？
A:萤光素底物约280 Da，萤光素的水溶性和脂溶性都非常好，很容易穿透细胞膜和血脑屏障。
Q:萤光素酶的表达稳定性如何？
A:萤光素酶基因能够通过稳定筛选等过程插到细胞染色体内，当细胞进行分裂、转移、分化从而进行持续稳定的表达，萤光素酶的半衰期约为3 h，故只有活细胞才能持续表达萤光素酶。
