D-荧光素 (D-Luciferin) 是荧光素酶的常用底物。D-荧光素利用荧光素酶报告基因在活体内表达产生的荧光蛋白发生化学反应产生荧光，从而使用高灵敏度的光学检测仪器检测动物活体体内的细胞活动和基因行为，普遍应用于生物领域，特别是生物活体成像技术。
一，D-萤光素生物发光的作用原理
D-荧光素能够在荧光素酶和ATP的作用下氧化成 oxyluciferin，在氧化过程中能够将化学能转化为光能，从而发出波长为 560 nm 左右的生物荧光 (图1)。将携带荧光素酶编码基因 (Luc) 的质粒转染入细胞后，接种到实验动物 (如小鼠) 体内，当外源 (腹腔或静脉等注射) 给予其底物D-荧光素，即可通过生物发光成像技术 (BLI) 来检测光强度变化，从而实时监测疾病发展状态，或药物的治疗效果等。
二，逐典D-萤光素钾盐优势
1.高纯度（HPLC验证纯度≥99%)
2.优异的生物发光性能
3.高溶解度（>40mg/ml)
三，应用场景
D-荧光素钾盐在不同领域具有多种应用场景。其中包括蛋白表达研究、抗肿瘤或抗病毒药物研究以及mRNA疫苗开发等。
蛋白表达研究：将Luc基因插入需要研究的蛋白中，可用于定量目标蛋白在实验动物体内的表达情况。
抗肿瘤或抗病毒药物：在肿瘤细胞或病毒中导入Luc基因，建立肿瘤或病毒感染小鼠模型，注射药物后，通过活体成像技术观测肿瘤大小或病毒感染的变化。
mRNA疫苗开发：在mRNA中插入Luc基因，脂质体包裹后注射实验动物后，可通过活体成像技术可观测疫苗的免疫效果。
四，客户之声
五，常见问题答疑
Q:D-萤光素钾盐的纯度是多少？纯度大小对实验有影响吗？
A:D-萤光素钾盐纯度≥99 %，萤光素纯度越高，相应污染物含量越低，相反则越高，污染物浓度过高将抑制某些酶和细胞中的生物学过程，可能会给实验结果带来偏差，并且可能会对实验动物造成伤害。
Q:D-萤光素钾盐溶解度是多少？其溶液稳定吗？
A:D-萤光素钾盐溶解度在40 mg/ml以上，其水溶液短期内存放于-80℃，对实验效果没有明显影响。对于部分条件较敏感的实验，为了控制实验中的可变因素，推荐反应液新鲜配制。例如，荧光素酶过低、非最适的反应条件等都需要高质量的底物才能进行反应。
Q:D-萤光素钾盐的建议用量是多少？
A:活体成像：以10 μL/g体重确定注射量。每只小鼠接受150 mg D-萤光素钾盐/kg体重（如对于体重为10 g的小鼠，需要注射100 μL以提供1.5 mg D-萤光素钾盐）。
体外成像：一般使用150μg/ml的工作液用于体外细胞成像。
Tips: 注射方式、动物类型以及体重等都会影响信号的发射，需要适当摸索，待萤光信号达到最强稳定平台期，再用相应仪器进行成像分析。
Q:配置好的D-萤光素钾盐溶液如何储存？
A:工作液现配现用，理想情况下，配置好的储存液可于-20℃储存较短时间。如有必要，萤光素溶液可在-20℃储存长达3周。
Tips: 上述溶液在任何一种温度长时间贮存下都有可能导致信号退化哦！
Q:萤光素（酶）底物的形式有哪些？
A:分为D-萤光素游离酸、D-萤光素钾盐和D-萤光素钠盐，由于水溶性高，因此钾盐和钠盐通常是最通用的两种检测底物，其中又以钾盐作为活体动物检测使用的主要形式。
Q:如何确定不同模型的峰值信号时间?
A:生物发光信号的动力学具有组织依赖性。建议每5-10min对动物进行一次成像，最多40 min，为每个新模型创建一个动力学曲线。(常见信号峰值时间点在10-15 min左右，萤光反应发光一般在30 min后衰减，3 h后完全消失。)具体详见逐典D-萤光素钾盐说明书“萤光素动力学曲线制备”。
Q:萤光素底物可以透过血脑屏障吗？
A:萤光素底物约280 Da，萤光素的水溶性和脂溶性都非常好，很容易穿透细胞膜和血脑屏障。
Q:萤光素酶的表达稳定性如何？
A:萤光素酶基因能够通过稳定筛选等过程插到细胞染色体内，当细胞进行分裂、转移、分化从而进行持续稳定的表达，萤光素酶的半衰期约为3 h，故只有活细胞才能持续表达萤光素酶。
