全能核酸酶，又称非限制性核酸内切酶，是一种主要来源于细菌Serratia Marcescens的非特异性核酸内切酶，能够降解各种形式的DNA和RNA，无论是双链还是单链，线状还是环状，天然的还是经过变性处理的。酶切产生的产物主要是2-5个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸，这是其特有的酶切特征。在实验研究和工业生产中都有广泛的应用。随着生物技术的不断发展，全能核酸酶的应用领域还将不断扩大。全能核酸酶都是目前唯一能够同时有效去除DNA和RNA的酶。
一，广阔的应用场景
1、降低细胞/细菌裂解时核酸释放产生的黏度，并且适用于任何裂解方式。
2、在大规模的层析纯化时，避免由于大量的核酸吸附在层析介质上降低蛋白质的有效载量从而降低纯化得率。
3、在 ELISA、二维电泳和免疫印迹分析中，提高分辨率和回收率。
4、消除重组蛋白、疫苗等生物制品的外源性核酸残留。
二，病毒生产与纯化
病毒疫苗的生产、基因与细胞治疗等产业均可能会用到病毒，这些产品的质量控制对于保障这些产品的安全性和有效性具有重要意义。其中宿主DNA残留可能会传递肿瘤或病毒相关基因，存在潜在的危险性，各国药品监督管理机构对其残留量有着严格的限度控制。
接下来小编带您一起了解在病毒纯化过程中如何正确使用全能核酸酶。
常见的病毒纯化流程
三，全能核酸酶的使用时间
我们可以选择在收获前、澄清后或是纯化后用全能核酸酶处理样品，一般选择在收获前或澄清后处理，可以提高病毒得率。
早期使用：可以减少大的DNA片段，并且可以在下游纯化步骤中去除残留的全能核酸酶。 但为了去除样品中大量的核酸，必须使用大量的酶。
后期使用：节约全能核酸酶的用量，降低成本；但必须增加一个去除全能核酸酶残留的步骤，并且，采用这种方式可能会导致病毒的得率减少。
四，全能核酸酶用量及处理时间
全能核酸酶的活性受到多种因素的影响（温度、pH、离子强度等），用量范围从0.1 U/mL-250 U/mL不等。因此，不同的操作环境酶的最佳浓度不同，需要通过实验测定。
五，应用实例：
1.样品：狂犬病毒浓缩液
处理条件:核酸酶浓度50~90U/ml ,
37 ℃处理 2 h,转入18 ~ 26 ℃处理 6h
表 1.不同酶浓度对狂犬病病毒收获液中 Vero 细胞 DNA 的去除效果【1】
2.样品：狂犬病病毒浓缩液
处理条件：25、50和100 U/ml，37℃
表 2.不同浓度核酸酶作用不同时间去除 Vero 细胞 DNA 效果的比较【2】
3.样品：流感病毒浓缩液
处理条件：10 U/mL，37℃
表 3.核酸酶处理 300k 超滤浓缩效果(x± s，n=3)【3】
参考文献
[1] 崔燕平. 非限制性核酸内切酶对狂犬病疫苗中Vero细胞DNA的去除作用[J]. 中国生物制品学杂志, v.27(04):444-447.
[2] 刘杰,刘辉,杨会强,康庄,孙艳,毛川成,何敏,李玉华.多种方法结合去除冻干人用狂犬病疫苗中Vero细胞残留DNA[J].中国生物制品学杂志,2013,26(12):1827-1830.
[3] 阮朝列,施锦丽,李卫东等.Benzonase核酸酶在Vero细胞流感病毒灭活疫苗中的应用研究[J].病毒学报,2023,39(04):980-990.
